二維液相層析質譜法(2D-HPLC/MS)是連接兩種不同分離方式在一次過程中對複雜樣品進行分離的技術，第一維的過程中通常是使用IEC(Ion exchange chromatography)，依照分析物內帶不同的電性(正電荷、負電荷或不帶電荷)先做第一次的分離，或是採用SEC(Size exclusion chromatography)，依據分析物所含成分的大小來做初步的分離，之後依次進入到第二個管柱，通常是使用C18管柱依分子的極性與管柱的作用力來做第二次的分離，分離出來的流析液再流經質譜來做偵測。
本實驗所採用的二維液相層析系統是使用IEC結合RPC兩種管柱對綠茶、烏龍茶、紅茶進行分析，實驗所使用的IEC的SPE管柱。以純水萃取茶葉後，注入茶葉溶液的量為200μL，之後以不同濃度的緩衝溶液沖提管柱，沖提的體積約為1000μL，收集下來後在分別以μ-HPLC/MS來進行分離。
實驗也以一維的方式對不同發酵程度(不發酵、半發酵以及全發酵)的七種茶葉進行分離及質譜的偵測，來比較不同發酵程度的茶葉所得到質譜圖的差異。同時也對不同品牌的紅茶進行比較。

無

目錄

摘要………………………………………………………….Ⅰ

目錄………………………………………………………….Ⅱ

圖目錄……………………………………………………….Ⅳ

表目錄……………………………………………………….Ⅵ

壹、緒論
一、前言 ………………………………… …………………1
二、高效能液相層析結合質譜儀(LC/MS)的開發 … …….3
三、二維液相層析………… ………………………………10
四、離子交換層析法…… …………………………………10
五、論文目標………… ……………………………………11
貳、實驗………………… …………………………………12
一、儀器裝置………………… ……………………………15
二、μ-HPLC操作條件……………………………………16
三、使用藥品及試劑………………………………………17
四、配製方法………………………………………………18
五、實驗流程………………………………………………19
六、茶葉的製造過程….………………………………….20
參、結果與討論……………………………………………25
肆､結論…………………………………………………...58


圖目錄

圖一、SPE流程圖。
圖二、SPE (ion exchange)儀器裝置圖。
圖三、LC- Agilent 1100 series質譜儀-Bruker esquire 3000 plus ion trap。
圖四、茶葉製造流程圖。
圖五(A)、以1D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得的BPC (base peak chromatogram)譜圖。
圖五(B)、以2D-μHPLC-MS分析烏龍茶[以NaCl不同濃度沖提IEC管柱所收集的溶液，進行RPC分離所到得的BPC (basic peak chromatography)譜圖]。
圖六(A)、以1D-μHPLC-MS分析綠茶所得的BPC譜圖。
圖六(B)、以2D-μHPLC-MS分析綠茶所得的BPC譜圖。
圖七(A)、以1D-μHPLC-MS分析紅茶所得的BPC譜圖。
圖七(B)、以1D-μHPLC-MS分析紅茶所得的BPC譜圖。
圖八(A)、以1D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得的BPC (basic peak chromatography)譜圖。
圖八(B)、以2D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得的BPC (basic peak chromatography)譜圖。
圖九(A)、以1D-μHPLC-MS分析綠茶所得的BPC譜圖。
圖九(B)、以2D-μHPLC-MS分析綠茶所得的BPC譜圖。
圖十、以1D-μHPLC-MS分析綠茶所得的BPC譜圖。
圖十一、以μHPLC-MS分析龍井茶（不發酵茶）所得的層析圖。
圖十二、以μHPLC-MS分析茶不發酵茶:綠茶(圖A)及龍井(圖B)所得的全部EIC (Extract ion chromatograms)圖譜。
圖十三、以μHPLC-MS分析包種茶（部分發酵茶）所得的層析圖及訊號。
圖十四、以μHPLC-MS分析烏龍茶（部分發酵茶）所得的層析圖及訊號。
圖十五、以μHPLC-MS分析鐵觀音（部分發酵茶）所得的層析圖。
圖十六、以μHPLC-MS分析茶不發酵茶:綠茶(圖A)及龍井(圖B)所得的全部EIC (Extract ion chromatograms)圖譜。
圖十七、以μHPLC-MS分析紅茶（全發酵茶）所得的層析圖
圖十八、以μHPLC-MS分析普洱茶（後發酵茶）所得的層析
表目錄

表一、以1D-μHPLC-MS所得到的質譜訊號。
表二、以2D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得質譜訊號。
表三、以1D-μHPLC-MS所得到的質譜訊號。
表四、以1D-μHPLC-MS分析綠茶所得的質譜訊號。
表五、以1D-μHPLC-MS所得到的質譜訊號。
表六、以2D-μHPLC-MS所得到的質譜訊號。
表七、文獻中分析茶葉以正離子模式測得物質。
表八、文獻中分析茶葉以負離子模式測得物質。
表九、以1D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得到的質譜訊號。
表十、以2D-μHPLC-MS分析烏龍茶所得到的質譜訊號。
表十一、以1D-μHPLC-MS分析綠茶所得到的質譜訊號。
表十二、以2D-μHPLC-MS分析綠茶所得到的質譜訊號。
表十三、一維與二維所得訊號比較表。
表十四、以1D-μHPLC-MS分析龍井茶所得到的質譜訊號。
表十五、以1D-μHPLC-MS分析龍井茶所得到的質譜訊號。
表十六、以μHPLC-MS分析包種茶所得的質譜訊號。
表十七、以μHPLC-MS分析鐵觀音所得的質譜訊號。
表十八、以μHPLC-MS分析紅茶所得的質譜訊號。
表十九、以μHPLC-MS分析潽耳茶所得的質譜訊號。

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