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博碩士論文 etd-0812104-155335 詳細資訊
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論文名稱
Title
安培偵測法在流動注入分析系統中對肝素與葡萄糖胺之偵測
Amperometric dectection of heparin and glucosamine in flow injection analysis
系所名稱
Department
畢業學年期
Year, semester
語文別
Language
學位類別
Degree
頁數
Number of pages
75
研究生
Author
指導教授
Advisor
召集委員
Convenor
口試委員
Advisory Committee
口試日期
Date of Exam
2004-07-29
繳交日期
Date of Submission
2004-08-12
關鍵字
Keywords
葡萄糖胺、電化學偵測、肝素、流動注入分析系統
heparin, glucosamine, electrochemical detection, flow injection analysis
統計
Statistics
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中文摘要
肝素(heparin)是一種化學性質特異的長鏈分子,屬於醣胺聚醣( glycosaminoglycans ),平均分子量15 kDa,是外科手術中被廣泛運用的一種抗凝血劑( anticoagulant agent ),在醫學界極具重要性。一般在臨床醫學的外科手術中,對肝素含量的偵測需求在2~8 U/ml ( 相當於0.8~3.2μM ),由於肝素本身帶高電荷又不具吸收及螢光特性,因此在定量分析上有所限制。
本實驗以循環伏安法將鎳電極於強鹼溶液中,於電極面上形成一氧化鎳薄膜具有電催化肝素氧化的能力,以安培偵測法(即定電位下監測電流訊號)結合流動注入法(flow injection analysis)對肝素進行偵測,偵測極限可達1 ppm,在1 ppm( 0.16 U/ml , 5.5x10-8 M )至15 ppm及20 ppm至60 ppm(9.6 U/ml, 3.3x10-6 M)兩個濃度範圍內,有良好的線性關係,適用於一般手術中與手術後預防血管栓塞對肝素含量偵測的需求。此外將肝素經由酸水解處理後,再進行偵測,可得到較大的電流訊號,與較低的偵測極限,其偵測線性範圍在0.2 ppm~ 60 ppm,具相當良好的線性關係。
另外使用濺鍍的方法,於矽晶圓上濺鍍一層鎳的薄膜,製備成濺鍍鎳薄膜電極,並以偵測葡萄糖胺來比較濺鍍鎳薄膜電極與一般鎳電極的偵測效果。濺鍍鎳薄膜電極展現良好的偵測範圍,偵測極限比一般鎳電極更低,可達到0.1 μM,且具有相當好的再現性,可應用於偵測其他醣類,亦可做為拋棄式電極,或與HPLC連接做為偵測電極。
Abstract
Amperometric dectection of heparin and glucosamine in flow injection analysis
目次 Table of Contents
摘要…………………………………………………………………..Ⅰ
謝誌…………………………………………………………………..Ⅲ
目錄…………………………………………………………………..Ⅳ
圖目錄………………………………………………………………..Ⅸ
表目錄……………………………………………………………..ⅩⅡ
第一章 緒論…………………………………………………………....1
一、肝素簡介………………………………………………………1
1.前言………………………………………………………….1
1.2肝素的結構………………………………………………..2
1.3肝素的抗凝血機制………………………………..………5
1.3.1前言………………………………………………………5
1.3.2人體正常的凝血機制……………………………………5
1.3.3肝素的抗凝血機制……………………………………..10
1.4水解肝素的方法……………………………………….…12
1.4.1酵素水解………………………………………………..12
1.4.2酸水解(acid hydrolysis)……………………………...…12
1.4.3去胺基水解(deaminative hydrolysis)…………………..14
二、電催化與鎳電極簡介…………………………………………17
2.1電催化…………………………………………………….17
2.2鎳電極的特性…………………………………………….17
2.3鎳電極的偵測原理……………………………………….20
三、偵測肝素的方法……………………………………………..21
3.1臨床上偵測肝素的方法………………………………….21
3.1.1 活化凝固時間(activated partial thromboplastin,ACT)..21
3.1.2活化部分凝血活素時間(activated partial thromboplastin time, aPTT)…………………...…………………………21
3.2電化學上偵測肝素的方法……………………………....23
3.2.1.電位偵測法(potentiometric detection)……………..…..23
3.2.2離子通道感測器(ion-channel sensor) ……………..…..23
3.2.3安培偵測法(amperometric detection) …………….…...24
3.2.4壓電石英晶體感測器(piezoelectric quartz crystal sensor,QCM) ………………...……………………..…24
3.2.5電化學阻抗頻譜 (electrochemical impedance spectroscopy,EIS) 分析技術……………………….…25
3.3其他偵測肝素的方法…………………………...…….…26
3.3.1比色法(colorimetry)……………………………..……..26
3.3.2螢光偵測法(fluorescence detection)及紫外光/可見光吸收偵測法(UV/VIS absorption dectection) …..…..……..27
3.3.3化學發光偵測法(chemiluminescence detection)..…..27
3.3.4表面電漿共振(surface plasmon resonance,SPR)技術...27
四、濺鍍鎳薄膜電極對葡萄糖胺的偵測……………….……..29
五、研究目的………………….………………..…..….…….…30
第二章 實驗與結果……………….……………………..………….…32
2.1藥品……………….…………………………..……….…32
2.2溶液配製………….…………………………..….………32
2.3儀器設備……………………………………...….………33
2.4流動注入分析(flow analysis)結合電化學安培偵測法…37
2.5實驗步驟………………………………………….………38
2.5.1鎳電極的製作………………….……………………….38
2.5.2鎳電極表面的研磨與清潔…………………………….39
2.5.3鎳電極的前處理………………….……………...…….40
2.6實驗過程…………………………..…..…………...…….40
2.6.1 實驗裝置…………….…………….……..……...…….40
2.6.2 肝素的酸水解……….………………….…..…...…….41
2.7結果與討論…………….….……………..………....…….41
2.7.1鎳電極的前處理…………….……………..……...…...41
2.7.2電位對肝素偵測電流訊號大小的影響………..…........43
2.7.3載體溶液濃度對肝素偵測電流訊號大小的影響……..44
2.7.4載體溶液流速對肝素偵測電流訊號大小的影響….....45
2.7.5鎳電極對肝素偵測的校正曲線……..…….…………...46
2.7.6鎳電極對肝素偵測的再現性……………………..……50
2.7.7鎳電極對酸水解肝素的偵測……………………..……51
2.7.8 鎳電極偵測肝素的干擾………………………..……..53
2.8濺鍍鎳薄膜電極對葡萄糖胺的偵測……………..……..54
2.8.1濺鍍鎳薄膜製備…….....……………………………….55
2.8.2濺鍍鎳薄膜的表面特性………………………………..56
2.8.3濺鍍鎳薄膜電極製作過程……………………………..57
2.8.4實驗過程………………………………………………..58
2.8.5濺鍍鎳薄膜電極對葡萄糖胺的偵測…………………..59
2.8.5.1濺鍍鎳薄膜電極的前處理…………………………..59
2.8.5.2電位對葡萄糖胺偵測電流訊號大小的影響………..61
2.8.5.3載體溶液流速對葡萄糖胺偵測電流訊號大小的影響
………………………………………………………………..62
2.8.5.4 濺鍍鎳薄膜電極對葡萄糖胺偵測的校正曲線…….63
2.8.5.5 濺鍍鎳薄膜電極對葡萄糖胺偵測的再現性……….65
2.8.5.6濺鍍鎳薄膜電極與鎳電極對葡萄糖胺偵測之比較..67第三章 結論……………………………………………………….…..69
第四章 參考文獻……………………………………………….……..70
參考文獻 References
1.Gilman, A. G.; Rall, T. W.; Nies, A. S.; Taylor, P. Goodman and Gilman's the pharmacological basis of therapeutics 8th ed.; Pergamon Press: New York, 1990.
2.Beaumont, G. E.; Doods, E. C. Recent advances in medicine, J&A Churchill, 1952.
3.Dietrich, C. P. Biochem. J. 1968, 108, 647.
4.Jaques, L. B. Pharmacol. Rev. 1980, 31, 99.
5.Yang, V. C.; Meyerhoff, M. E.; Ramamurthy, N.; Chang, L. C.; Han, I. S.; Yun, J. H. PSTT, 1999, 2(3), 102.
6.Rabenstein, D. L. Nat. Prod. Rep. 2002, 19, 312.
7.金明儒, 藥物學, 中華藥學研究基金會, 1988.
8.溫武慶, 血液疾病之多少,健康世界雜誌:臺北市, 1998.
9.王文正,李安容,黃偉展,葉嘉新, 最新實用藥理學, 永大書局:臺北市,1999.
10.Katzung, B. G. Basic & clinical pharmacology 8th ed.;Lange Medical Books/McGraw-Hill: New York, 2001.
11.何敏夫,凝固作用,血液學,合記出版社,台北,509-528,(2001)
12.金蒞穎,認識血液病, 書泉出版社:臺北市, 1995.
13.Linhardt, R. J.; Chaidedgumjorn, A.; Toida, T. Trends. Glycoscience and Glycotechnology 2003, 15(81), 29.
14.李婷婷,聚苯胺修飾電極對肝素之偵測,碩士論文,中山大學化學系研究所,1999.
15.王文憲, 藥理學精義, 合記圖書出版社: 台北市,1995.
16.Ogura, H.; Hasegawa, A.; Suami,T. Carbohydrates-Synthetic Methods and Applications in Medicinal Chemistry ; Wiley-Vch:
Kodansha, 1992
17.Conard, H. E.; Shively, J. E. Biochemistry, 1970, 9(1), 33.
18.陳煌明,化學改良電極急酵素生化改良電極應用在生化之測定,碩士論文,中山大學化學系研究所,1999.
19.羅一玲,無電鍍鎳與鎳渡層之電化學特性與應用,博士論文,台灣科技大學化學工程技術研究所,1995.
20.Fleischmann, M.; Korinek, K.; Pletcher, D. J. Electroanal. Chem. 1971, 31, 39.
21.Constantin, D. M.; Rus, E. M.; Oniciu, L.; Ghergari,L. J. Power Sources 1998, 74, 188.
22.Kuwana, T.; Luo, P. F.; Marioli, J. M. Anal. Chim. Acta 1993, 282, 571.
23.Nagai, J. Sol. Energy Mater. Sol. Cells 1993, 31, 291.
24. Passerini, S.; Scrosati, B. J. Electrochem. Soc. 1994, 141, 889.
25.Chen, J. J. Electrochem. Soc. 1999, 146, 3606.
26.Schick, K. G.; Magearu, V. G. ; Huber, C. O. Clin. Chem. 1978, 24, 448.
27.Breitwieser, Ch.; Winsauer, K.; Buchberger, W. Fresenius' Z. anal. Chem. 1983, 175, 517.
28.Effen, R. M. V.; Reim, R. E. Anal. Chem. 1986, 58, 3203.
29.Huber, C. O.; Schick, K. G.; Morrison, T. N. Anal. Chim. Acta 1980, 120, 75.
30.Fleischmann, M.; Korinek, K.; Pletcher, Perki Trans., 2 1972, 2, 1396.
31.Huber, C. O.; Hui, B. S. Anal. Chim. Acta 1982, 134, 211.
32.Huber, C. O.; Kafil, J. B. Anal. Chim. Acta 1985, 175, 275.
33.Baldwin, R. P.; Zhang, F.; Luo, P. Anal. Chim. Acta 1991, 244, 169.
34.Horányi, G.; Vértes, G. J. Electroanal. Chem. Interfacial. Electrochem.1974, 52, 47
35.Smith, C.; Pletcher, D. Amjad, M. J. Electrochem. Soc. 1977, 124, 203.
36.Huber, C. O.; Arikawa, Y. Anal. Chim. Acta 1990, 229, 191.
37.Arvía, A. J.; Vilche, J. R.; Guzmán, R. S. S. J. Electrochem. Soc. 1978, 125(10), 1578.
38.Weininger, J. L.; Breiter, M. W. J. Electrochem. Soc. 1963, 110(6), 484.
39.蔡佑杰, 臨床診斷與檢驗正常值手冊,合記圖書出版社: 台北市,1999.
40.廖繼思, 中井鍵五, 大鹿英世, 富野昭子, 護用藥理學 ,五南書局社:臺北市,2003.
41.李勇進,潭延輝,顏茂雄, 醫用藥理學, 九州圖書文物有限公司:台北市,1993.
43.Ma, S. C.; Yang, V. C.; Fu, B.; Meyerhoff, M. E. Anal. Chem. 1993, 65, 2078.
44.Ma, S. C.; Yang, V. C.; Meyerhoff, M. E. Anal. Chem. 1992, 64, 694.
45.Fu, B.; Bakker, J. Y.; Wang, E.; Yang, V.; Meyerhoff, M. E. Electroanalysis, 1995, 7, 823.
46.Umezawa, Y.; Aoki, H.; Xiao, K. P.; Bühlmann, P.; Gadzekpo, V. P. Y. Anal. Chim. Acta. 2000, 411, 163.
47.Lewinski, K.; Hu, Y.; Griffin, C. C.; Cox, J. A. Electroanalysis 1997, 9, 675.
48.Chang, H. C.; Lin, T. M.; Cheng, T. J. Anal. Chim. Acta 2002, 462, 261.
49.鄭宗記,壓電石英晶體感測器在生物醫學上的應用,博士論文,成功大學醫學工程研究所
50.Klein, M. D.; Drongoeski, R. A.; Linhardt, R. J.; Langer, R. S. Anal. Biochem. 1982, 124, 59.
51.Malsch, R.; Torri, G. G.; Lohr, G.; Casu, B.; Langer, R. S. Anal. Biochem. 1994, 124, 59.
52.Steen, R. A.; Nieman, T. A. Anal. Chim. Acta 1983, 155, 123.
53.侯明宏,甘魯生 科儀新知1999,20 (6), 88.
54. Hall, E. A. H.; Gaus, K. J. Colloid. Interface. Sci. 1995. 169, 422.
55. Hall, E. A. H.; Gaus, K. J. Colloid. Interface. Sci. 1997. 194, 364.
56. Hall, E. A. H.; Gaus, K. J. Colloid. Interface. Sci. 1997. 194, 373.
57. Hall, E. A. H.; Gaus, K. Biosens. Bioelectron.. 1998. 13, 1307.
58. Wang, J. Analytical electrochemistry, Jonh Wiley& sons: New York, 2nd, 2000.
59. Kuwana, T.; Luo, P. F. Anal. Chem. 1994, 66, 2775.
60. Watanabe, N; Tou, S.;Morita, M J. Chromatogt. A 1999, 837, 17.
61. Miwa, T.; Jin, J. Y. Analusis 1997, 25, 207.
62. Liu, A; Wang, E. J. Electroanal. Chem. Interfacial.Electrochem.1991, 319, 217.
63. Buchberger, W.; Stitz, E. Electroanalysis 1994, 6, 251.
64. Gatta, G.; Casella, I. G. Electroanalysis 2001, 13, 549.
65. Ruiz-Calero, V.; Puignou, L.; Galceran, M.T. J. Chromatogt. A 2000, 873, 269.
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