論文使用權限 Thesis access permission:校內校外均不公開 not available
開放時間 Available:
校內 Campus:永不公開 not available
校外 Off-campus:永不公開 not available
論文名稱 Title |
麩胺酸脫氫酶/聚苯胺修飾之組合式超微電極在麩胺酸偵測上的應用 Application of Polyaniline-Nafion Glutamic Dehydrogenase Assembly Ultramicro-Carbon Fiber Electrode (GLDH/PAn/ NF/CFE) for detection of Glutamate |
||
系所名稱 Department |
|||
畢業學年期 Year, semester |
語文別 Language |
||
學位類別 Degree |
頁數 Number of pages |
71 |
|
研究生 Author |
|||
指導教授 Advisor |
|||
召集委員 Convenor |
|||
口試委員 Advisory Committee |
|||
口試日期 Date of Exam |
2007-07-30 |
繳交日期 Date of Submission |
2007-09-10 |
關鍵字 Keywords |
麩胺酸脫氫酶 Glutamic Dehydrogenase |
||
統計 Statistics |
本論文已被瀏覽 5642 次,被下載 0 次 The thesis/dissertation has been browsed 5642 times, has been downloaded 0 times. |
中文摘要 |
近年來,在生化分析上的研究,生化感測器的發展逐漸受到重視,尤其在電化學方法中,以修飾電極技術開發出的生化感測器,逐漸被用於臨床檢驗上。其具有簡單操作、價格便宜和訊號反應快速等優點。 本論文是以本實驗室開發的聚苯胺修飾技術,製成聚苯胺酵素修飾組合式超微電極(GLDH/PAn/NF/ CFE),其具有聚苯胺電極對銨離子特有的偵測能力,和酵素本身的高專一特性來進行偵測,並透過超微電極本身高訊號雜訊比的特性,可對生化電極的靈敏進一步提升。本實驗所使用的酵素為麩胺酸脫氫酶 (Glutamic Dehydrogenase, GLDH ),搭配輔酶(Nicotinamide Adenine Dinucleotide, NAD+),可與麩胺酸(Glutamate)作用,釋放出銨離子(如下式),經由聚苯胺修飾酵素電極測得,進而可間接定量麩胺酸。 L-glutamate + NAD+ + H2O 2-ketoglutarate + NADH + NH4+ 實驗結果顯示,在 FIA 系統下偵測麩胺酸,偵測極限達 1 μM,並有不錯的再現性(RSD = 1.42%, n =14)和穩定性。 |
Abstract |
none |
目次 Table of Contents |
第一章 緒論............................................................................................1 1.1 前言.............................................................................1 1.2 電聚合 (Electropolymerizatio..................................3 1.3 組合式微電極 ( Assembly microeletrode ) 在電極上的優點..............................................................................7 1.4 聚苯胺及導電性聚合物簡介.....................................9 1.5 酵素簡介...................................................................12 1.6 NADH 及 GLDH 簡介..............................................14 1.7 文獻中對麩胺酸的分析............................................16 1.8 研究目的....................................................................17 第二章 聚苯胺修飾/組合式超微電極...............................18 2.1 前言...............................................................................18 2.2 實驗...............................................................................18 2.2.1 藥品與容易配製.......................................................18 2.2.2 儀器設備...................................................................20 2.2.3 自製微電極之製作...................................................23 2.2.4 聚苯胺修飾電極之製備(Pan/NF/CFE...................26 2.3 實驗流程........................................................................29 2.3.1 PAn/NF/CFE 的循環伏安圖...................................32 2.3.2 PAn/NF/CFE 對 NH4+ 離子的偵測效果..............33 2.3.3 PAn/NF/CFE 的偵測效果.......................................34 2.3.4 偵測麩胺酸鹽電流訊號的再現性...........................35 2.4 結論...............................................................................37 第三章 聚苯胺麩胺酸脫氫酶修飾超微電極.....................38 3.1 前言...............................................................................38 3.2 實驗...............................................................................38 3.2.1 藥品與溶液配製......................................................38 3.2.2 儀器設備..................................................................39 3.2.3 聚苯胺/麩胺酸脫氫酶修飾電極之製備.................40 3.2.4 GLDH/PAn/NF/CFE 對麩胺酸鹽的催化反應及 偵測過程..............................................................41 3.3 結果與討論..................................................................45 3.3.1 GLDH/PAn/NF/GCE 的酵素固定.........................45 3.3.2 BSA 含量對偵測 Glutamate的影響.....................45 3.3.3 GA 含量對偵測 Glutamate 的影響......................46 3.3.4 GLDH 含量對偵測 Glutamate 的影響................47 3.3.5 NAD+ 含量對偵測 Glutamate 的影響.................48 3.3.6 載體流速對偵測 Glutamate 的影響.....................49 3.3.7 載體溶液 pH 最佳化的探討...................................50 3.3.8 GLDH/PAn/NF/GCE 的再現性對 電流訊號的影響......................................................52 3.3.9 麩胺酸標準溶液的偵測..........................................53 3.3.10 干擾物的影響.......................................................55 第四章 總結........................................................................56 第五章 參考文獻................................................................57 |
參考文獻 References |
1.Osamu, N.; Tsutomu, H.; Keiichi, T. Biosens. & Bioelectro., 1997, 12, 311. 2.Justin, C.; Mingjie, Z. Anal. Chim. Acta, 1999, 402, 47. 3.Cooper, J. M.; ies, McNeil, C. J.; Spoors, J. A. Anal. Chim. Acta, 1991, 245, 57. 4.Wang, J.; Hutchins-Kunar, L. D. Anal. Chem. 1986, 58, 402. 5.Pasco, N.; Jeffries, C.; Dav Q.; Downard, A. J.; Roddick-Lanzilotta, A. D.; Gorton, L. Biosens. & Bioelectro., 1999, 14, 171. 6.Jose, L. R.; Juan, F.; Monica, C.; Maria, J. B. FEMS Microbio., 1998, 159, 15. 7.Tudes, A. J.; Ozinga, W. J. Anal. Chem. 1990, 62, 367. 8.Nakano, T.; Ikawa, N.; Ozimek, L. J. Agric. Food Chem. 2007, 55. 2714. 9.Michalska, A.; Konopka, A.; Maj-Zurawska, M. Anal. Chem. 2003, 75; 141. 10.Qi, B.; Lu, W.; Mattes, B. R. J. Phys. Chem. B. 2004. 108. 6222. 11.Torres-Gomez, G.; Tejada-Rosales, E. M.; Gomez-Romero, P. Chem. Mater. 2001; 13. 3693. 12.Wring. S. A.; Hart. J. P. Analyst. 1992, 117, 1215. 13.Limoges, B.; Marchal, D.; Mavre, F.; Saveant, J.-M. J. Am. Chem. Soc. 2006, 128. 2084. 14.Ionescu, R. E.; Cosnier, S.; Marks, R. S. Anal. Chem. 2006, 78. 6327. 15.Marzouk, S. A. M.; Ashraf, S. S.; Al Tayyari, K. A. Anal. Chem. 2007, 79. 1668. 16.Aguey-Zinsou, K.-F.; Bernhardt, P. V.; Kappler, U.; McEwan, A. G. J. Am. Chem. Soc. 2003, 125. 530. 17.Reda, T.; Hirst, J. J. Phys. Chem. B. 2006, 110. 1394. 18.Kissinger. P. T.; Heineman. W. R. “Laboratory Techniques in Electroanalytical Chemistry”. Dekker. 1984. 19.Grene, R. L.; Street, G. B.; Suter, L. J. Phys. Rev. Lett. 1975, 34. 577. 20.Shirakawa, H.; Louis, E. J.; MacDiarmid, A. G.; Chiang, C. K.; Heeger, A. J. J. Chem. Soc. Chem. Commun., 1977, 10, 558. 21.Chiang, C. K.; Fincher, C. R.; Pork, Y. M.; Heeger, A. J.; Shirakawa, H.; Louis, E. J.; Gau, S. C.; MacDiarmid, A. G. Phys. Rev. Lett., 1977, 39, 1098. 22.Syed, A. A.; Dinersan, M. K. Talanta. 1991, 38, 815. 23.Xinsheng, W.; Xin, J.; Dawei, G; Linjiang S. Rare Metals. 2006, 25. 67. 24.Ryu, K. S.; Jeong, S. K.; Joo, J.; Kim, K. M. J. Phys. Chem. B. 2007, 111. 731. 25.Man, K. Y. K.; Wong, H. L.; Chan, W. K.; Djurisic, A. B.; Beach, E.; Rozeveld, S. Langmuir. 2006, 22. 3368. 26.Jiang, R.; Dong, S. Synth. Met., 1990, 39, 209. 27.Syed, A. A.; Dinesan, M. K. Synth. Met., 1990, 36, 209. 28.Kulesza, P. J.; Chojak, M.; Karnicka, K.; Miecznikowski, K.; Palys, B.; Lewera, A.; Wieckowski, A. Chem. Mater. 2004, 16. 4128. 29.Chang, H.; Yuan, Y.; Shi, N.; Guan, Y. Anal. Chem. 2007, 79. 30.Sai, V. V. R.; Mahajan, S.; Contractor, A. Q.; Mukherji, S. Anal. Chem.; (Article); 2006, 78. 8368. 31.Mohilner, D. M.; Adams, R. N.; Argersinger, W. J. J. Am. Chem. Soc., 1962, 84, 3618. 32.陳國誠. 微生物酵素工程學. 藝軒出版社, 1992. 33.Scheller, F.; Schvbert, F. “Techniques and Instrumentation in Analytical Chemistry: Biosensers.”, Elserver, 1992. 34.Deore, B. A.; Freund, M. S. Chem. Mater. 2005, 17. 2918. 35.http://dwb.unl.edu/teacher/nsf/c11/c11links/web.indstate.edu/thcme/mwking/nitrogen-metabolism.html 36.McMahon. C. P.; O'Neill. R. D. Anal. Chem. 2005, 77. 1196. 37.Huang, X.-J.; Im, H.-S.; Lee, D.-H.; Kim, H.-S.; Choi, Y.-K. J. Phys. Chem. C. 2007, 111. 1200. 38.Boo. H.; Jeong. R.-A.; Park. S. Anal. Chem. 2006, 78(2); 617. 39.Rahmam, M. A.; Kwon, N.-H.; Won, M.-S.; Choe, E. S.; Shim, Y.-B. Anal. Chem. 2005, 77. 4854. 40.Diaz, A. F.; Logan, J. A. J. Electroanal. Chem., 1980, 111, 111. 41.Genies, E. M.; Tsintavis, C. J. Electroanal. Chem., 1985, 195, 109. 42.Kitani, A.; Izumi, J.; Yano, J.; Sasaki, K. Bull. Chem. Soc. Jap., 1984, 57, 2254. 43.Kalaji, M.; Nyholm, L.; Peter, L. M. J. Electroanal. Chem., 1991, 313, 271. 44.Walt. D. R.; Hgayn. V. I.Trends . Anal.Chem.,1994, 13. 425 45.Cotton. F. A.; Wilkinson. G. “ Advanced Inorganic Chemistry ”. 5th ed. Wiley. New York. 1988. 46.P. W. Carr, “Immobilized Enzymes in Analytical and Clinical Chemistry fundamentals and applications”, Wiley, New York, 1980. 47.Timofeeva. O. N; Lubentsov. B. Z. Synth. Met. 1991, 40. 111. |
電子全文 Fulltext |
本電子全文僅授權使用者為學術研究之目的,進行個人非營利性質之檢索、閱讀、列印。請遵守中華民國著作權法之相關規定,切勿任意重製、散佈、改作、轉貼、播送,以免觸法。 論文使用權限 Thesis access permission:校內校外均不公開 not available 開放時間 Available: 校內 Campus:永不公開 not available 校外 Off-campus:永不公開 not available 您的 IP(校外) 位址是 54.175.70.29 論文開放下載的時間是 校外不公開 Your IP address is 54.175.70.29 This thesis will be available to you on Indicate off-campus access is not available. |
紙本論文 Printed copies |
紙本論文的公開資訊在102學年度以後相對較為完整。如果需要查詢101學年度以前的紙本論文公開資訊,請聯繫圖資處紙本論文服務櫃台。如有不便之處敬請見諒。 開放時間 available 已公開 available |
QR Code |